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醫用化學/比色分析的測量方法

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無論是光電比色計還是分光亮度計,最常用的測量方法有如下兩種。

(一)標準曲線計

先配制一系列不同濃度的標準溶液,用選定的顯色劑顯色。選用合適波長的入射光(光電比色計用濾光片,分光亮度計可轉動波長調節器)。測定時先以空白溶液調節透光率100%,然后分別測定標準系列的吸亮度。以吸亮度為縱坐標,濃度為橫坐標作圖得到一條通過原點的直線,叫做標準曲線(或稱工作曲線)。

例如,測定維生素B12時,可預先繪制維生素B12的A-c標準曲線(圖8-11),再用完全相同的方法和步驟測定被測溶液的吸亮度,即可從標準曲線上找出被測溶液的濃度或含量。

這種方法叫做標準蛐線法。標準曲線可在固定儀器和方法的條件下多次使用,適合于經常性工作。但若儀器不同或測定方法及條件改變,測得的標準曲線不同。因此在更換任何測定條件時都需重新繪制標準曲線。

維生素B12的標準曲線


圖8-11 維生素B12的標準曲線

(二)直接比較計算法

若僅對個別樣品進行測定,且A-c曲線線性良好,可水作標準曲線而直接比較測定結果。

先配制一個被測物質溶液濃度相近的標準溶液,與被測溶液在相同條件下測定吸光度。根據下式可以計算。

A=Kcb

A=Kcb

由于使用同一波長的入射光,采用同樣的比色皿,測定同樣的物質。所以

K=K

b=b

因此A/A=c/c

則c=A/A×c

32 比色測量儀器 | 比色分析應用示例——鐵的含量測定 32
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