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臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)

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抗凝劑種類很多，性質(zhì)各異，必須根據(jù)檢驗(yàn)止的適當(dāng)選擇，才能獲得預(yù)期的結(jié)果。現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)常用抗凝劑及其使用方法簡(jiǎn)述如下：

1、乙二胺四乙酸（EDTA）鹽 EDTA有二鈉、二鉀和三鉀鹽。均可與鈣離子結(jié)全成螯合物，從而阻止血液凝固。

Na₂C₁₀H₁₄O₈N₂+C_A²⁺→C_AC₁₀H₁₂O₈N₂+2N_A⁺+2H⁺

EDTA鹽經(jīng)100⁰C烘干，抗凝作用不變，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。EDTA鹽對(duì)紅、白細(xì)胞形態(tài)影響很小，根據(jù)國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)公委員會(huì)（International committee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建議，血細(xì)胞計(jì)數(shù)用EDTA二鉀作抗凝劑，用量為EDTA-K2。2H2O1.5-2.2Mg （4.45±0.85μmol）/ml血液。EDTA-NA與EDTA-K2對(duì)血細(xì)胞計(jì)數(shù)影響均較小，但二鈉溶解度明顯低于二鉀，有時(shí)影響抗凝效果，其他抗凝劑不適合于血細(xì)胞計(jì)數(shù)。表1-1是幾種抗凝劑對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響，EDTA影響小板聚集，不適合于作凝血象檢查和血小板功能試驗(yàn)。

表1-1 不同抗凝劑不同條件保存血液的WBC變化（×10⁹/L）

	40C	200C	320C
	30‘1h 2h 4h 8h	30’1h 2h 4h 8h	30’1h 2h 4h 8h
EDTA-K2	6.6 6.5 6.56.5 6.5	6.5 6.5 6.56.5 6.5	6.4 6.5 6.56.5 6.5
EDTA-NA	6.3 6.2 6.36.4 6.5	6.3 6.3 6.46.3 6.4	6.3 6.3 6.46.3 6.3
肝素	5.6 4.9	5.3 5.14.23.6	5.6 5.6 5.65.3
敬椽酸鈉	6.5 6.2 6.05.6 5.6	6.4 6.3 6.26.0 5.8	5.9 5.9 6.05.8 5.7

2.枸椽酸鈉（trisodiumcitrate）枸椽酸鹽可與血中鈣離子形成可溶性螯合物，從而阻止血液凝固。

2N_a3C₆H₅O₇+2C_A²⁺→2C_AC₆H₅O₇^-+6N_a⁺

枸椽酸鈉有2Na₃C₆H5_O7。和2N_a3C₆H_5。11H₂O等多種晶體。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液（也有用106mmol/l濃度），與血液按1：9或1：4比例使用。枸椽鈉對(duì)凝血V因子有較好的保護(hù)作用，使其活性減低緩，故常用于凝血象的檢查，也用于紅細(xì)胞沉降率的測(cè)定。因毒性小，是輸積壓保養(yǎng)中的成分之一。

由于枸椽酸鈉溶液是按體積肥比例加入血液內(nèi)達(dá)到抗凝目的的，而抗凝劑主要是作用于積壓漿成分，通常所謂的1：9比例抗凝的概念是提1份體積的抗凝劑作用9份紅細(xì)胞比積正常血液內(nèi)的血漿成分而言。所以臺(tái)果對(duì)貧血或紅細(xì)胞增多癥患者的血液仍按1：9的比例加入抗凝劑時(shí)，就會(huì)發(fā)生抗凝劑足或相對(duì)過(guò)多，這將明顯地影響凝象檢查結(jié)果。為了避免這種現(xiàn)象，有文獻(xiàn)報(bào)道應(yīng)根據(jù)抗凝劑用量（ml）=0.00185×血量×（100—病人紅細(xì)胞比積%）這一公式，來(lái)計(jì)算抗凝劑的用量。

3．草酸鈉（sodiumoxalate）草酸鹽可與血中鈣離子生成草酸鈣沉淀，從而阻止血液凝固。

草酸鈉通常用0.1mol/L濃度，與血液按1：9比例使用，過(guò)去主要用于凝務(wù)象檢查。實(shí)踐發(fā)現(xiàn)草酸鹽對(duì)凝備V因子保護(hù)功能差，影響凝血酶原時(shí)間測(cè)定效果；另外由于草酸鹽與鈣結(jié)合形成的是沉淀物，影響自動(dòng)凝血儀的使用，因此，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為凝積壓象檢查選用枸椽酸鈉為抗凝劑更為適宜。

4．肝素（heparin）肝素廣泛在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細(xì)胞和暑堿性粒細(xì)胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團(tuán)的粘多糖，是分散物質(zhì)，平均分子量為15000（2000-40000）。肝素可加強(qiáng)抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）滅活絲氨酸蛋白酶，從而具有阻止凝血酶形成，對(duì)抗凝血酶和阻止血小板聚集等多種作用。每毫升血液抗凝需要持素15±2.5Iu 。盡管肝素可以保持紅細(xì)胞的自然形態(tài)，但由于其常可引起白細(xì)胞聚集關(guān)使用涂片在羅氏（）染色時(shí)產(chǎn)生藍(lán)色背景，因此肝素抗凝血不適全血液學(xué)一般檢查。肝素是紅細(xì)胞透滲脆性試驗(yàn)理想的抗凝劑。

靜脈采血法 | 血涂片的制備和細(xì)胞染色

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