組織學(xué)/組織培養(yǎng)術(shù)

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組織學(xué)

組織學(xué)緒論
- 組織學(xué)研究方法

前述幾種方法都是取人體或在體（in vivo）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的組織，經(jīng)固定等處理后，對(duì)已死亡的組織進(jìn)行觀察研究的。組織培養(yǎng)(tissue culture)或稱體外實(shí)驗(yàn)（in vitro）則是取活組織或活細(xì)胞在體外適宜的環(huán)境中培養(yǎng)成活，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。細(xì)胞在體外生存必須具有近似體內(nèi)的生存條件，如充足營養(yǎng)供應(yīng)，合理的O₂與CO₂比例，必要的電解質(zhì)和適宜的滲透壓，pH值、溫度和濕度等，還需防止微生物污染。組織培養(yǎng)的特點(diǎn)在于可用研究各種理化因子（溫度、激素、藥物、毒物等）對(duì)活細(xì)胞的直接影響，并能觀察記錄（攝影、錄像）。組織培養(yǎng)與前述方法結(jié)合應(yīng)用，可研究某種因素對(duì)細(xì)胞增殖、分化、代謝、運(yùn)動(dòng)、吞噬、分泌等影響和調(diào)節(jié)的動(dòng)態(tài)過程，以及細(xì)胞病變、癌變和逆轉(zhuǎn)等機(jī)理，獲得在體實(shí)驗(yàn)難達(dá)到的研究目的。

組織培養(yǎng)用液為平衡鹽水及血清（小牛血清、胎盤血清等），羊水、腹水、組織浸出液等天然培養(yǎng)基(natural medium)。天然培養(yǎng)基成分復(fù)雜，且不穩(wěn)定。目前廣泛應(yīng)用人工合成培養(yǎng)基（synthetic medium）現(xiàn)有多種商品供應(yīng)，使用方便，但常仍需補(bǔ)充部分血清等。若僅用合成培養(yǎng)基和已制備好的幾種必須因子與激素，稱此為無血清培養(yǎng)基（serum-free medium），其成分和含量均是已知的，可精細(xì)研究某種因子對(duì)細(xì)胞的生物效應(yīng)。

組織培養(yǎng)的方法甚多，常用容器有凹玻片、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、流動(dòng)小室等。取組織塊貼于瓶底進(jìn)行培養(yǎng)，可觀察從組織塊生長遷移出的細(xì)胞。取胚胎某器官原基或器官的一部分進(jìn)行培養(yǎng)，稱器官培養(yǎng)（organ culture）。更精細(xì)的方法是分離和純化組織中的某種細(xì)胞，使之貼附在瓶底形成單層細(xì)胞（圖1－18），稱此為細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）。首次培養(yǎng)的細(xì)胞，稱原代培養(yǎng)（primary cultrue；細(xì)胞增殖而密集再傳代培養(yǎng)，稱傳代培養(yǎng)（subculture）。經(jīng)長期培養(yǎng)而成的細(xì)胞群體，稱細(xì)胞系（cell line）；用細(xì)胞克隆（cell clone）或單細(xì)胞培養(yǎng)而建成的某種純細(xì)胞群體，稱細(xì)胞株（cell strain）。它們均可在液氮內(nèi)長期凍存，供隨時(shí)應(yīng)用。現(xiàn)已建成多種腫瘤細(xì)胞株，廣泛用于實(shí)驗(yàn)研究。