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轉(zhuǎn)化 (生物)

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轉(zhuǎn)化英語(yǔ):transformation,又譯轉(zhuǎn)型)即細(xì)胞通過(guò)攝取外源遺傳物質(zhì)(DNARNA)而發(fā)生遺傳學(xué)改變的過(guò)程。在轉(zhuǎn)化過(guò)程中,轉(zhuǎn)化的DNA片段稱為轉(zhuǎn)化因子。受體菌只有處在感受態(tài)時(shí)才能夠攝取轉(zhuǎn)化因子。轉(zhuǎn)化因子通常是質(zhì)粒DNA。而質(zhì)粒融合或病毒感染是導(dǎo)致引入外源DNA的原因。動(dòng)物細(xì)胞的轉(zhuǎn)化又被稱為轉(zhuǎn)染(transfection)。轉(zhuǎn)基因植物的產(chǎn)生通常也被認(rèn)為是一種轉(zhuǎn)化。

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞通過(guò)特殊處理后可變成感受態(tài)細(xì)胞,即可以接受外源DNA。有兩種常用方法:

  1. 電穿孔法:細(xì)胞與DNA混合;高電壓脈沖;隨后在富營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基內(nèi)復(fù)蘇。多用于對(duì)酵母細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。
  2. 化學(xué)方法:將細(xì)胞懸浮于0℃的氯化鈣溶液中,并加入外源DNA(一般為質(zhì)粒),混合后放置約半小時(shí);短暫(一般為75-90秒)升溫至42℃(即熱休克);加入富營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基以進(jìn)行復(fù)蘇。該方法一般用于對(duì)原核細(xì)胞,特別是大腸桿菌的轉(zhuǎn)化。

以上方法盡管原理仍然未知,但實(shí)驗(yàn)證明有效。

參考文獻(xiàn)

參見(jiàn)


參考來(lái)源

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