基礎檢驗學/人絨毛膜促性腺激素檢查

跳轉到：導航, 搜索

臨床基礎檢驗學

尿液檢查
- 尿液理學檢查
- 尿液化學檢查
- 尿沉渣檢查
- 干化學尿液分析儀
- 人絨毛膜促性腺激素檢查

成熟女性因受精的卵子移動到子宮腔內著床后，形成胚胎，在發育成長為胎兒過程中，胎盤合體滋養層細胞產生大量的人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,HCG），可通過孕婦血液循環而排泄到尿中。當妊娠1-2.5時，血清和尿中的HCG水平即可迅速升高，第8郛周達到高峰，至郛期第4個月始降至中等水平，并一直維持到妊娠末期。（圖9-1）

正常妊娠婦女血清中HCG平均值

圖9-1 正常妊娠婦女血清中HCG平均值

HCG是由兩個非共價鍵相連的肽鏈組成的糖蛋白激素。其單個亞基不具有生物活性，當連接成完整化合物時始具活性，分子量約為4.7萬。其主要功能就是刺激黃體，有利于雌激素和黃體酮持續分泌，以促進了宮蛻膜的形成，使胎盤生長成熟。HCGα亞單位的氨基酸排列與黃體生長激素（LH）α亞單位相似，故用完整的抗HCG分子的抗體測定HCG時與LH間有免疫交叉反應。但它們的β亞單位各不相同。因此為避免交叉反應，目前均采用高將近的抗β-HCG單克隆抗體進持特異的HCG檢查，近年來還有報道采用抗β-HCG羧基末端肽單克隆抗體以進一步提高檢測的敏感性和特異性。

（一）膠乳凝集抑制試驗和血凝抑制試驗

1960年Wide及Gemzell開始采用膠乳凝集抑制試驗(latex agglutinationinhibitiontest,LAIT)技術測定尿中HCG，即將尿液與抗 HCG血清作用后，加入已吸附抗原的膠乳，如尿中含HCG較多，則先與抗 HCG結合，不再有多余的抗 HCG與膠乳產生凝集而仍呈均勻的乳膠狀，是為陽性。相反，不含HCG尿不與抗血清作用，當加入吸附抗原的膠乳后，抗血清可與膠乳抗原反應，出現明顯的“特”特性凝集顆粒，即為陰性。也可利用血細胞的血凝抑制試驗(hemoagglutinationinhibition test,HAIT)，其原理與膠乳法一致只是載體由膠乳改成羊紅細胞。這兩種試驗方便簡便，靈敏度為100-500Mu/ML，適合大批標本檢查，但因特異性差，不能定量，已逐漸被單克隆抗體法所取代。

（二）放射免疫試驗（RIA）

利用放射標記的HCG與被檢測尿中的HCG競爭性地結合抗-HCG抗體，當被檢尿中HCG增加時，結合物的放射性減低，與不同含量標準品對比可測尿中HCG的含量。使定量檢測成為可能。

由于RIA需一定設備，試驗手續繁甭，且有核素污染問題，不適用于臨床常規應用。

（三）酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

該方法目前已廣泛應用于臨床，其基本原理是運用夾心免疫酶分析技術。即采用HCG單克隆抗體包被于固相表面，樣品中的HCG都將與支持物表面的抗體相結合。與樣品一孵育后，沖洗耳恭聽表面，然后加入特異性酶標抗β-HCG亞基的單克隆抗體，最后加入酶作用的基質，即產生顏色。該法可目測，靈感度為20-50Mu/ml,采用抗β-HCG單克隆抗體二點酶免疫法進行定量，靈敏度可達2-10mU/ml。目前免疫酶法進一步發展為更簡便、適于病人自檢的一步法，即免疫酶滲透試驗。

（四）單克隆抗體膠體金試驗

免疫膠體金法是將羊抗人HCG抗血清（多抗）、羊鼠IGG分別固定特制的纖維素試帶上并呈兩條線上下排列，羊抗鼠IGG線在試帶知上方為陰性對照，羊抗人HCG多抗在下方為測定。試帶條中含均勻分布的膠體金標記鼠抗人β-HCG單克隆抗體和無關的金標記鼠IGG。檢測時將試帶浸入被檢尿液中（液面低于固定的兩條抗體線）后迅速取出。尿液沿試帶上行，尿中的β-HCG在上行過程中與膠體金標記單克隆抗體結合，待行至羊抗人HCG抗體線時，形成金標記的β-HCG單元抗尿HCG羊抗人HCG復合物而在試帶上呈茲紅色區帶，為HCG陽性反應，試帶上無關的金標記鼠IGG隨尿液繼續上行至羊抗鼠IGG處時與之形成紫紅色的金標記的抗原體復合物是為陰性對照。判斷結果時，含HCG的尿液試帶可顯示上、下兩條紫紅色線條，而陰性標本則只顯出上邊一條紫紅色線。

［方法學評價］縱觀HCG檢查方法，有生物激動、化學法、免疫法等。幾種不同的HCG檢查方法比較見表9-1。免疫法的檢測手段不斷更新、向特異簡便、快速、普及方向發展，現已有膠乳或血凝抑制試劑、放射免疫、酶免疫、膠體金紙片法等。除診斷早期妊娠早孕釘，HCG檢查對病理妊娠職宮外孕及胎盤滋養層疾病的診斷、鑒別、治療及追蹤觀察等均有意義。

表9-1 幾種檢查HCG方法的比較

妊娠試驗名稱	靈敏度（mU/ml或IU/L）	實驗條件	應用價值
雄蟾蜍（青蛙）試驗（MT）	3000	需合格動物、簡便需4-12小時	不能定量已淘汰
膠乳凝集抑制試驗（LAIT）	100-500	試劑易得、簡便，5min完成	一般早孕，敏感性低不能定量，少用
紅細胞凝集抑制試驗（HAIT）	100-500	試劑條件要求高2小時完成	敏感性低，少用半定量
放射免疫試驗（RIA）	<2	要求一定設備，條件要求高2小時完成	試劑可定量，最靈敏，但很少應用
酶聯免疫吸附試驗（ELISA）過篩法		多種形式，小珠、板、薄片包被，5-15min完成	半定量，靈敏度好廣泛應用
夾心酶免疫試驗	20-50	試劑，免疫應用板1-3小時可完成	可定量，靈敏度高常應用
免疫膠體金法	10-25	1-15min完成	半定量，靈敏度好廣泛應用

［參考值］妊娠不同時期以及各孕婦之間血清HCG絕對值變化大，一般非孕婦女血HCG<100IU/L，妊娠期間血清HCg 水平見表9-2。

在妊娠最初3個月，HCG水平每（2.2±0.5）天約升高一倍，尿HCG（HCG半定量法）非孕婦女<25IU/L，孕40天>5000IU/L,孕60-70天>(8-32)×10⁴IU/L（清晨尿HCG水平最高，接近血清水平）。

表9-2 妊娠期間血清HCG水平

妊娠周數	HCG（IU/L）
0.2-1	5-50
1-2	50-500
2-3	100-5000
3-4	500-10000
4-5	1000-50000
5-6	10000-100000
6-8	15000-200000
2-3月	10000-100000

［臨床意義］ HCG的檢查對早期妊娠診斷有重要意義，對與妊娠相關疾病、滋養細胞腫瘤等疾病的診斷、鑒別和病程觀察等有一定價值。

1．診斷早期妊娠：孕后35-50天HCG可升至大于2500IU/L。60-70天可達8萬萬IU/L，多胎妊娠者尿HCG常于一胎妊娠。

2．異常妊娠與胎盤功能的判斷：①異位妊娠：如宮外孕時，本試驗只有60%的陽性率，在子燥出血3天后，HCG仍可為陽性，故HCG檢查可作為與其它腹癥的鑒別。HCG常為312-625IU/L。②流產診斷與治療：不完全流產如子宮內尚有胎盤組織殘存，HCG檢查仍可呈陽性；完全流主或死胎時HCG由陽性轉陰性，因此可作為保胎或吸宮治療的參考依據。③先流產：如尿中HCG仍維持高水平多不會發生難免流產。如HCG在2500IU/L以下，并逐漸下降，則有流產的或死胎的可能，當降至600IU/L則難免流產。在保胎治療中，如HCG仍繼續下降說明保胎無將近，如HCG不斷上升，說明保胎成功。④在產后4天或人工流產術后13天，血清HCG應低于1000IU/L，產后9天或人工流產術后25天，，血清HCG應恢復正常。如不符合這一情況，則應考慮有異常可能。

3．滋養細胞腫瘤診斷與治療監測①葡萄胎、惡性葡萄胎、絨毛膜上皮癌及睪刃畸胎瘤等患者尿中HCG顯著升高，右可達10萬到數百萬IU/L，可用稀釋試驗診斷如妊娠12周以前1：500稀釋尿液呈陽性，妊娠12周以后1：250稀釋尿液呈陽性，對葡萄胎診斷有價值。1：100-1：500稀釋尿液呈陽性對絨毛膜癌也有診斷價值，如男性尿中HCG升高，要考慮睪刃腫瘤如精原細胞癌、畸形及異位HCG瘤等。②滋養層細胞腫瘤患者術后3周后尿HCG應<50IU/L,8-12周呈陰性；如HCG不下降或不轉陰，提示可能有殘留病變，這類閏例常易復發，故需定期檢查。

4．其它更年期、排卵及雙側卵巢切除術均可致黃體生成素升高，因LH與HCG的α肽鏈組成相同而使采用抗HCG抗體的妊娠試驗陽性，此時可用β-HCG的單克隆二點酶免疫測定鑒別。內分泌疾病中如腦垂體疾病、甲狀腺功能亢進、婦科疾病如卵巢囊腫、子宮癌等HCG也可增高。近年來發現惡性腫瘤如默契胎瘤、胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、肺癌等血中HCG也可升高，因此將HCG看作是癌標志物之一。但必需結合臨床情況及其它檢查結果綜合分析結果綜合分析判斷。